按下研发加速键!CytoSpark 跨种属单抗筛选方案重磅来袭

2025-01-09 浏览量:1次

筛选通量高

一次可实现百万级别浆 B 细胞的筛选,提高了候选分子的数量,尤其对于人/鼠/猴同源性较低的靶点的筛选提供了更高的可能性

1天内完成筛选

从脾脏到阳性 B 细胞的获得,仅需 1 天时间,大幅缩短单抗筛选周期

交叉实验方案

通过多重荧光标记单次筛选即可得到多种属交叉反应的抗体,降低开发成本,提高临床转化效率

IgG序列获取方案灵活选择

下游既可衔接单细胞 BCR 扩增方案,精准拿到所需 IgG 序列;也可对接单细胞测序方案,一次筛选拿到所有 IgG 序列

目前,全球生物制药产业正处于快速上升期。抗体药物和生物疫苗被认为是未来生物医药领域的“潜力股”。 抗体药物的开发周期包括多个阶段[1],如前期研究、药物发现、临床前、临床及上市等。一个新药的开发涉及多个学科和领域的科学家共同合作,通常需要至少十年,并耗资数十亿美元。

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除了单抗的开发消耗大量时间、人力和物力外,临床前动物实验也是抗体药开发中非常重要的环节。在单 B 筛选阶段,获得种属交叉反应的抗体可以加速抗体的前期筛选,节省动物药理及药效实验的费用和时间。因此,开发种属交叉抗体筛选方案对抗体药的开发具有重要意义。

CytoSpark 高通量筛选系统解锁种属交叉反应抗体开发解决方案

1. 动物免疫过程中,不同种属的抗原进行交叉免疫。当双种属抗原的效价达到合适的滴度后,提取脾脏组织进行单 B 细胞筛选。

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2. 小鼠 CD138+ 浆 B 细胞富集试剂盒富集得到 1-2M 细胞后进行液滴包裹,液滴内体系设计如图所示:

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3. 浆 B 细胞包裹到液滴内孵育 1-2h 后荧光显微镜下质检,明确液滴中的浆 B 细胞分泌的抗体具有交叉结合能力。

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4. 荧光显微镜下质检看到典型的阳性液滴之后,利用 CytoSpark 高通量分选仪进行分选,选取 cyno antigen 和 human antigen 双阳性的液滴进行阳性 B 细胞回收打印以及后续验证。

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5. 利用单细胞 BCR 扩增试剂盒获得轻重链序列,合成表达后进行体外验证,利用 ELISA 验证双阳性率 89.1%,FACS 验证双阳性率 84.4%。

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CytoSpark CSP 微流控高通量细胞筛选系统

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应用领域:

可溶性蛋白抗体筛选

跨膜蛋白抗体筛选

双特异性抗体筛选

激动型抗体筛选

中和抗体筛选

通量高:

单次筛选百万级 B 细胞,更好的保留 B 细胞的多样性提高筛选效率

周期短:

一天内完成 B 细胞筛选,相比传统杂交瘤、噬菌体展示等技术,大幅度缩短研发周期和研发成本

准确性高:

多激光的搭配使用,可有效降低假阳性,提高筛选准确性

损伤小:

独特的介电泳分选技术能显著降低对细胞的损伤,保持细胞活性和抗体分泌功能

适用性广:

适用于可溶性抗原、跨膜蛋白等多种类型的抗原,提供完整且成熟的筛选方案 

拓展性:

基于三激光四色的配置可以灵活开发种属交叉、功能性抗体等相关应用

1天内完成筛选:

从脾脏到阳性 B 细胞的获得,仅需 1 天时间,大幅缩短单抗筛选周期

液滴生成

孵育

液滴分选

液滴收集

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1. Matthews H, Hanison J, Nirmalan N. "Omics"-Informed Drug and Biomarker Discovery: Opportunities, Challenges and Future Perspectives. Proteomes. 2016 Sep 12;4(3):28. doi: 10.3390/proteomes4030028. PMID: 28248238; PMCID: PMC5217350.

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