细菌内毒素系指革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖和蛋白的复合物,细菌死亡或自溶后会释放内毒素,内毒素大量进入血液会引起发热反应-“热原反应”。 细菌内毒素检查法利用鲎试剂检测或量化由革兰氏阴性菌产生的细菌内毒素,以判断样品中内毒素限量是否符合规定。其原理是内毒素活化鲎试剂中的C因子,使鲎试剂发生一系列酶联反应,最终形成凝胶或使凝固酶活化外加的显色基团原理,来检测细菌内毒素含量。
主要检测方法分为凝胶法和光度法。
凝 胶 法
凝胶法主要用于内毒素的定性和半定量,虽是内毒素检测的标准方法,但检测范围有局限性,且对检测用水和检测条件均有要求。 光度法光度测定法又分为浊度法和显色基质法,浊度法包括动态浊度法和终点浊度法,显色基质法分为动态显色法和终点显色法,可定量检测内毒素含量。
浊度法是通过内毒素与鲎试剂的C因子产生反应,由此激活的凝固酶会切断凝固蛋白原中的精氨酸肽链,形成凝胶状蛋白;而显色基质法,则是通过测定内毒素与鲎试剂反应时产生的凝固酶使某种特殊底物释放出来的生色团的量,来检测内毒素含量的鲎试验法。凝胶法vs光度法